人胚肺成纤维细胞;WI-38
人胚肺成纤维细胞;WI-38
形态特性: ; 成纤维细胞样
特征特性: ; Leonard Hayflick建系;有限传代细胞系;寿命为50±10代(倍增时间24h);来自妊娠3个月的正常胚胎肺组织。
培养条件: ; MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) ;10%FBS;1%NEAA
传代方法: ; 1:2~1:4传代;2~3天换液1次。
传代情况: ;P19
冻存条件: ; 基础培养基+8%DMSO+20%FBS
支原体检测: ;培养法(-)
STR ;Amelogenin:X;CSF1PO:10,12;D13S317:11;D16S539:11,12;D18S51:16,18;D19S433:13,16.2;D21S11:30,30.2;D2S1338:19,25;D3S1358:16,17;D5S818:10;D7S820:9,11;D8S1179:14;FGA:22,24;TH01:8,9.3;TPOX:8;vWA:19,20;
生长特性:贴壁生长
培养条件: MEM (NEAA),10%FBS
传代方法: 1:3传代
冻存条件:细胞冻存液
细胞处理方法:
1. 细胞在培养瓶中培养至状态良好后灌满培养基运输,获得细胞后用酒精棉球擦拭瓶口消毒,然后在超净台中操作。
2. 如细胞生长至70%-80%,将瓶中的培养基移入无菌瓶中留作培养使用,保留5-8mL培养基在37℃、5%的CO2的温箱中继续培养。细胞培养至90%-100%后,按要求消化传代。
3. 弃去培养基,用无菌PBS或者其他缓冲液清洗细胞2次,加入适量yi蛋白酶消化(EDTAyi酶),待细胞wan全脱壁后加培养基吹打混匀,分瓶培养。
特别注意:(如使用公共实验室或初次接触细胞培养,建议添加双抗培养)